図１　破骨細胞分化誘導光遺伝学ツールOpto-RANKcの構造と培養細胞での応答。(A)　Opto-RANKcの構造と青色光に対する反応。Opto-RANKcはシロイヌナズナ由来の光感受性ドメインCRY2、赤色蛍光タンパク質mCherryとマウスRANKの細胞内ドメインの融合タンパク質である。青色光を照射すると多量体を形成して、破骨細胞分化シグナルを生み出す。(B) 培養細胞（HEK293T）で発現するOpto-RANKcと緑色蛍光タンパク質GFP融合TRAF6の青色光に対する応答。光照射によりOpto-RANKcとTRAF6は多量体を形成する。スケールバーは20 µm。

図２　Opto-RANKc細胞の青色光照射による分化。Opto-RANKcがRAW264.7細胞に導入されたOpto-RANKc細胞について解析した。(A)　Opto-RANKc細胞に7日間、特定のパルス条件下で光照射したのちTRAP染色をすると、赤く染色された巨大な破骨細胞ができる（右）。左は野生型RAW264.7細胞。スケールバーは150 µm。(B)　野生型RAW264.7細胞をRANKLで、Opto-RANKc細胞を光により5日間分化誘導し、破骨細胞特異的遺伝子Acp5、Nfatc1、Mmp9の遺伝子発現を定量PCRにより解析した。光照射Opto-RANKc細胞でこれらの遺伝子発現の上昇がみられる。

図３　骨吸収活性の光によるコントロール。Opto-RANKc細胞をリン酸カルシウムでコーティングした48ウェル培養プレート上で光照射しながら13日間培養した。リン酸カルシウムコーティングは最後に染色液により青く染色した。白く抜けている部分（ピット）が破骨細胞に吸収された部分となる。スケールバーは2 mm。培養プレートの半分に光照射し、残りの半分を遮光した。右のグラフは左右半分それぞれのピットの割合を測定した結果を示す。光照射した側でピットが多く存在する。