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間葉系幹細胞の増殖

特定のドナーから各種の間葉系組織を採取し、有核細胞を種々の細胞密度で播種し、14日間培養して、クリスタル・バイオレットで染色すると、コロニー形成率は組織により異なる。培養期間が同じであれば大きなコロニーを形成する培養条件が、その細胞群の最大増殖能を示すものとなる。コロニー同士が接触するとコロニーの大きさは小さくなるが、細胞密度が低いと1ディッシュ当たりの回収量が少なくなる。そのため私たちは、コロニー間の接触が明らかでなく、かつコロニー数が最多のものを至適細胞密度として、この密度で播種した細胞を回収し、解析を行なっている。

参考
Use of differentiating adult stem cells (marrow stromal cells) to identify new downstream target genes for transcription factors.
Ylostalo J, Smith JR, Pochampally RR, Matz R, Sekiya I, Larson BL, Vuoristo JT, Prockop DJ.
Stem Cells. 2006
Mesenchymal stem cells derived from synovium, meniscus, anterior cruciate ligament, and articular chondrocytes share similar gene expression profiles.
Segawa Y, Muneta T, Makino H, Nimura A, Mochizuki T, Ju YJ, Ezura Y, Umezawa A, Sekiya I.
J Orthop Res. 2009
Morphological differences during in vitro chondrogenesis of bone marrow-, synovium-MSCs, and chondrocytes.
Ichinose S, Muneta T, Koga H, Segawa Y, Tagami M, Tsuji K, Sekiya I.
Lab Invest. 2010